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武漢華聯(lián)科生物|實(shí)驗(yàn)操作
你是否了解過(guò)懸尾試驗(yàn)？這是一種被廣泛用于評(píng)估嚙齒類(lèi)動(dòng)物抑郁樣行為的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法，尤其在抗抑郁藥物篩選及抑郁模型驗(yàn)證中發(fā)揮著重要作用。今天，我們就來(lái)詳細(xì)了解一下懸尾試驗(yàn)。
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懸尾試驗(yàn)的基本原理在于模擬一種動(dòng)物無(wú)法逃脫的應(yīng)激情境。實(shí)驗(yàn)中，小鼠被倒掛于懸尾支架上，由于無(wú)法逃脫這種不適狀態(tài)，它們會(huì)表現(xiàn)出強(qiáng)烈的掙扎行為。然而，當(dāng)小鼠意識(shí)到逃脫無(wú)望時(shí)，會(huì)逐漸進(jìn)入一種“絕望”狀態(tài)，停止掙扎，身體保持垂直倒懸的靜止?fàn)顟B(tài)。這種不動(dòng)狀態(tài)的持續(xù)時(shí)間被用作衡量動(dòng)物抑郁程度的指標(biāo)，不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)，通常認(rèn)為抑郁程度越重。
適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境
將小鼠從SPF飼養(yǎng)環(huán)境中取出，并讓其在實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)10-15分鐘，以減少環(huán)境應(yīng)激對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
使用醫(yī)用膠帶將小鼠尾巴（距尾尖約1cm處）輕輕固定于懸尾支架上，確保小鼠頭部朝下，與懸尾箱底面保持約30cm的距離。
將小鼠懸空5-6分鐘。在這段時(shí)間內(nèi)，密切觀察小鼠的行為表現(xiàn)。
記錄小鼠在懸空期間的運(yùn)動(dòng)、掙扎、縮卷等行為反應(yīng)，這些將用于后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。
根據(jù)小鼠在懸空期間表現(xiàn)出的行為反應(yīng)，評(píng)估其焦慮抑郁行為水平。
肢體不動(dòng)不掙扎
小鼠停止掙扎，身體保持垂直倒懸狀態(tài)，靜止不動(dòng)。這一指標(biāo)可視為實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)習(xí)得性無(wú)助后放棄掙扎的行為表現(xiàn)，不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)，抑郁程度越重。
掙扎時(shí)間的長(zhǎng)短反映了小鼠在面臨挑戰(zhàn)時(shí)的動(dòng)力和興趣。掙扎時(shí)間短可能意味著缺乏足夠的動(dòng)力去嘗試擺脫困境，是抑郁癥狀的一個(gè)標(biāo)志。
正常情況下，小鼠在懸空時(shí)會(huì)表現(xiàn)出一定的運(yùn)動(dòng)活躍度，如嘗試移動(dòng)、調(diào)整姿勢(shì)等。而抑郁小鼠則可能縮成一團(tuán)或幾乎不動(dòng)，缺乏探索或逃避的動(dòng)機(jī)。
尾巴卷曲程度也可能反映小鼠的焦慮或抑郁情緒。實(shí)驗(yàn)期間尾巴卷曲程度明顯增強(qiáng)可能是小鼠在緊張或不安時(shí)的一種自我保護(hù)行為。
保持環(huán)境安靜
實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持安靜，避免突然或持續(xù)的噪音使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物驚慌失措。
建議實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)不超過(guò)6分鐘，以避免時(shí)間過(guò)長(zhǎng)對(duì)小鼠造成過(guò)度壓力。
選擇合適的小鼠
選擇同批次、同齡、同種類(lèi)、同性別的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
膠帶纏綁位置
應(yīng)纏在接近動(dòng)物尾巴尖端的地方，避免纏在靠近尾巴根部，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
底部放置托盤(pán)
底部建議放置一個(gè)可拆卸的托盤(pán)，用于收集糞便或尿液，保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的整潔。
數(shù)據(jù)分析
在分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)，需要考慮實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間的差異，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)論的可靠性。